一种RNA建库的方法

基本信息

申请号 CN202011003145.9 申请日 -
公开(公告)号 CN112176421A 公开(公告)日 2021-01-05
申请公布号 CN112176421A 申请公布日 2021-01-05
分类号 C40B50/06;C12Q1/6806 分类 组合技术〔8〕;
发明人 冯延叶;李艳玲;郭仕妹;赖煦卉;孙大鹏 申请(专利权)人 上海英基生物科技有限公司
代理机构 湖北天领艾匹律师事务所 代理人 上海英基生物科技有限公司
地址 201100 上海市闵行区园美路58号2幢4层、5层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种RNA建库的方法及试剂盒,涉及基因测序领域。所述方法,包括以下步骤:1)合成First cDNA,形成DNA/RNA杂交链;2)用固定有Tn5转座酶复合体的链霉亲和素磁珠对First cDNA杂交链打断并连接接头;3)片段化的杂交链缺口补齐及PCR扩增富集完整的文库。本发明提供的方法不仅建库过程操作简单,最快可以实现2小时完成RNA建库过程;而且,起始RNA的投入量比较灵活,打破了传统的一种Tn5转座酶量只针对特定的RNA的投入量进行建库的约束,降低转座酶对模板投入的依赖性,可以根据自己需求投入10ng到1ug不同量的RNA。