一种全长cDNA合成方法及其测序文库的构建
基本信息
| 申请号 | CN201810269723.X | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108410856A | 公开（公告）日 | 2018-08-17 |
| 申请公布号 | CN108410856A | 申请公布日 | 2018-08-17 |
| 分类号 | C12N15/10;C40B50/06 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 王邹;章高迪;杨帆;丁琼;郝升;丁悦;郭静 | 申请（专利权）人 | 武汉光谷创赢医学检验实验室有限公司 |
| 代理机构 | 杭州千克知识产权代理有限公司 | 代理人 | 裴金华 |
| 地址 | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号生物创新园B5栋1-3层 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种全长cDNA合成方法及其测序文库的构建。该方法包括以下步骤：（1）Total RNA的提取；（2）将步骤（1）中提取的Total RNA通过Oligo dT引物和长链逆转录酶的作用下合成第一链cDNA；（3）将步骤（2）中第一链cDNA作为模板，通过连接酶进行双链接头的连接；（4）将步骤（3）中的连接有双链接头的第一链cDNA在聚合酶的作用下进行双链富集，得到一种全长双链cDNA。通过该种全长cDNA合成方法得到一种无需进行片段化处理的全长cDNA，构建其测序文库，同时RNA 5’端不完整或者已降解的序列则不会发生此反应，避免了影响后续分析。 |
