人原代肝细胞与肝非实质细胞共培养方法
基本信息
| 申请号 | CN201310282851.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN103509751A | 公开（公告）日 | 2014-01-15 |
| 申请公布号 | CN103509751A | 申请公布日 | 2014-01-15 |
| 分类号 | C12N5/071(2010.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 胡康洪;周明;曹晓蓓 | 申请（专利权）人 | 康珞生物科技（常州）有限公司 |
| 代理机构 | 武汉开元知识产权代理有限公司 | 代理人 | 陈家安 |
| 地址 | 430071 湖北省武汉市高新大道666号光谷生物城B1栋411 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种人原代肝细胞与肝非实质细胞共培养方法，该方法是将新鲜的肝组织经暴露的血管用灌注溶液I和灌注溶液II冲洗干净；直至肝组织失去弹性消化完全；然后置于含有细胞洗液的培养皿中，筛选得到单细胞悬液；低密度接种到胶原包被的培养板或培养皿中培养，首先在生长因子的作用下形成100%融合度的单层共培养；最后置于加入含有2%DMSO的维持培养液培养；肝细胞堆积形成肝非实质细胞环绕、入侵生长的肝岛状结构。本发明利用常规的肝细胞分离技术，实现了长达120天的肝细胞体外长期培养与长达72天保持HBV易感性。并且该系统可发展为新的抗HBV药物筛选与评价平台，对抗病毒药物研究具有重要价值。 |
