粗品羊肝素钠中羊和猪基因含量的qPCR检测方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

粗品羊肝素钠中羊和猪基因含量的qPCR检测方法

基本信息

申请号	CN201910509895.4	申请日	-
公开（公告）号	CN112080553A	公开（公告）日	2020-12-15
申请公布号	CN112080553A	申请公布日	2020-12-15
分类号	C12Q1/6851;C12Q1/6806	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	姚瑶;金永生;李小明;靳彩娟;姚亦明	申请（专利权）人	苏州融析生物科技有限公司
代理机构	南京苏科专利代理有限责任公司	代理人	苏州融析生物科技有限公司
地址	215126 江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园C19楼5层507室
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种粗品羊肝素钠中羊和猪基因含量的qPCR检测方法，通过处理粗品羊肝素钠样品，分别得到用于测量羊DNA和猪DNA的溶液；其中用于测量猪DNA的溶液采用单独的试剂盒提取对猪DNA进行提取；并针对待测DNA溶液进行PCR扩增设计引物、PCR反应体系及PCR反应程序；最后分别使用羊DNA和猪DNA标准品制作相应的DNA含量标准曲线，利用PCR扩增制备的PCR模板，通过计算得到羊和猪DNA含量。本发明利用了TaqMan探针法进行检测，灵敏度高、特异性好、操作简单。通过肝素酶和硫酸软骨素酶组合酶解粗品羊肝素钠，有效解除了肝素、硫酸软骨素和硫酸皮肤素对PCR反应的抑制；由于羊肝素钠中猪DNA含量少，采用本发明提取方法，解决了微量猪DNA含量检测准确性问题，效果显著。