一种PTCH1基因缺失间充质干细胞的建立方法
基本信息
| 申请号 | CN202110272094.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112852819A | 公开（公告）日 | 2021-05-28 |
| 申请公布号 | CN112852819A | 申请公布日 | 2021-05-28 |
| 分类号 | C12N15/113(2010.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 魏昌盛;林强;王溢文;陈网平 | 申请（专利权）人 | 江苏和泽干细胞基因工程有限公司 |
| 代理机构 | 北京成实知识产权代理有限公司 | 代理人 | 张焱 |
| 地址 | 210000江苏省南京市江宁区科学园乾德路5号2号楼(紫金方山) | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种PTCH1基因缺失间充质干细胞的建立方法，具体步骤包括：步骤1，根据PTCH1基因序列，设计sgRNA序列；步骤2，sgRNA活性检测，确定最优sgRNA，最优sgRNA序列为GAGCTGTGGGTGGAAGTTGG；步骤3，将步骤2中切割效率最高的sgRNA和嘌呤霉素抗性的PGK‑puro质粒电转到骨髓间充质干细胞；步骤4，基因敲除验证；步骤5，将基因敲除质粒进行测序，本发明构建的PTCH1基因缺失间充质干细胞，可用于筛选促成骨形成药物。 |
