全基因组结合靶向扩增建库方法和试剂及病原检测方法

基本信息

申请号 CN201910198649.1 申请日 -
公开(公告)号 CN111690639A 公开(公告)日 2020-09-22
申请公布号 CN111690639A 申请公布日 2020-09-22
分类号 C12N15/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 江遥;邹婧;崔望;曾晨曦;蒋慧 申请(专利权)人 武汉华大智造科技有限公司
代理机构 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 代理人 彭愿洁;彭家恩
地址 430075湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物医药企业加速器3-1期24栋
法律状态 -

摘要

摘要 一种全基因组结合靶向扩增建库方法和试剂及病原检测方法,建库方法包括:获取样品全基因组DNA片段化后两端连接上双链接头的接头连接产物,其包括任选存在的目标区域和非目标区域;以接头连接产物为模板,采用第一基因特异性引物和下游文库扩增通用引物进行第一PCR扩增获得第一扩增产物,第一基因特异性引物与目标区域结合,下游文库扩增通用引物与双链接头的第一链结合;以第一扩增产物为模板,采用第二基因特异性引物、下游文库扩增通用引物和上游文库扩增通用引物进行第二PCR扩增获得第二扩增产物,第二基因特异性引物与目标区域结合,上游文库扩增通用引物与双链接头的第二链结合。本方法富集目标区域,不影响非目标区域,检测成本低、效率高。