一种高纯度经血来源干细胞的制备方法

基本信息

申请号 CN201610422697.0 申请日 -
公开(公告)号 CN106011052A 公开(公告)日 2016-10-12
申请公布号 CN106011052A 申请公布日 2016-10-12
分类号 C12N5/074(2010.01)I;A01N1/02(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 葛剑云;汪土根;刘心星;黄启明 申请(专利权)人 浙江奥比特生物科技有限公司
代理机构 宁波市鄞州甬致专利代理事务所(普通合伙) 代理人 李迎春
地址 315000 浙江省宁波市高新区江南路1558号浙大科技园15层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供一种高纯度经血来源干细胞的制备方法:使用经血采集套装收集经血;收集中间层单个核细胞;加入磁珠缓冲液,充分混匀后加入FcR试剂,孵育后再加入交联抗人抗体的微磁珠试剂,混匀后孵育;再加入磁珠缓冲液,洗涤、离心后重悬于磁珠缓冲液中;加入到预先放置于磁性分选架的分选柱中,使用磁珠缓冲液冲柱洗涤;将分选柱取出,加入1.5?2ml磁珠缓冲液,收集细胞悬液;将所得悬液用经血干细胞原代培养基培养,每2?3天半量换液一次;培养5?7天后消化收集贴壁细胞,用经血干细胞传代培养基继续扩增培养;消化所得细胞,加入冻存液进行冻存。该方法获得的经血来源干细胞纯度高,生长周期短,自我更新能力强、污染率低。