一种闪电克隆用反应混合试剂及其制备方法和应用
基本信息
| 申请号 | CN202111049566.X | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113667649A | 公开（公告）日 | 2021-11-19 |
| 申请公布号 | CN113667649A | 申请公布日 | 2021-11-19 |
| 分类号 | C12N9/00（2006.01）I;C12N15/52（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/66（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 刘立成;吴刚;闫广为;张治业 | 申请（专利权）人 | 苏州博特龙免疫技术有限公司 |
| 代理机构 | 北京中政联科专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 何磊 |
| 地址 | 215000江苏省苏州市漕湖街道观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及分子克隆技术领域，具体是公开了一种闪电克隆用反应混合试剂及其制备方法和应用，一种闪电克隆用反应混合试剂，包括具有核酸外切功能的同源重组酶、DNA连接酶和反应缓冲液；以总体系为20uL计，同源重组酶的用量是0.06uL‑0.18uL，DNA连接酶的用量是0.03uL‑0.15uL/总反应体系，余量为反应缓冲液；所述反应缓冲液中各组分的质量百分比为：Tris‑HCl 10‑16％、MgCl218‑26％、K3P 5‑15％、KCl 3‑9％、NaCl 10‑18％、二硫苏糖醇8‑12％、甘油15‑30％。本发明克服了现有技术的不足，采用同源重组酶将外源基因克隆至载体靶位点，本反应混合试剂的准确率更高，更为简单，使用方便，更为快速，且具有更高的克隆效率和稳定性。 |
