一种产磷脂酶D的基因工程菌及其构建方法与在sdLDL-C检测试剂盒开发中的应用

基本信息

申请号 CN202110144890.3 申请日 -
公开(公告)号 CN112899178A 公开(公告)日 2021-06-04
申请公布号 CN112899178A 申请公布日 2021-06-04
分类号 C12N1/19;C12N9/16;C12N15/81;C12Q1/44;C12Q1/60;C12R1/84 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 芮双印;张艳凤;符修乐 申请(专利权)人 安徽大千生物工程有限公司
代理机构 合肥兴东知识产权代理有限公司 代理人 李静
地址 231200 安徽省合肥市经开区桃花工业园繁华大道工投·立恒工业广场B12C
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及基因工程技术领域,提供了一种产磷脂酶D的基因工程菌。本发明还提供了上述产磷脂酶D的基因工程菌的构建方法,方法如下:优化磷脂酶D基因密码子、分析磷脂酶D基因糖基化位点、糖基化位点定点突变及全基因合成、获得初步工程菌、质粒抽提、毕赤酵母细胞转化、重组阳性转化子的鉴定。同时,本发明还提供了上述产磷脂酶D的基因工程菌在sdLDL‑C检测试剂盒开发中的应用。本发明的优点在于:本发明构建的产磷脂酶D的基因工程菌能够高效表达PLD蛋白,水解酶活达115.2U/mL,且实现了其对现有sdLDL‑C检测试剂盒中PLD的替代,大大降低相应试剂盒的生产成本。