基于NBDK的定点荧光标记方法
基本信息
申请号 | CN201610041992.1 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN105566440B | 公开(公告)日 | 2021-04-02 |
申请公布号 | CN105566440B | 申请公布日 | 2021-04-02 |
分类号 | C07K1/13(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
发明人 | 张贯京;陈兴明;张少鹏;高伟明;李慧玲;潘延超 | 申请(专利权)人 | 深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司 |
代理机构 | - | 代理人 | - |
地址 | 518063广东省深圳市前海深港合作区前湾一路1号A栋201室(入驻深圳市前海商务秘书有限公司) | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种基于NBDK的定点荧光标记方法,通过合成M.Barkeri物种的吡咯赖氨酸氨酰‑tRNA合成酶(PylRS)的DNA序列,并将所述DNA序列连接到pBK质粒上;通过采用“饱和突变”的方法,构建了能够在原核和真核生物细胞中表达的M.Barkeri物种的吡咯赖氨酸氨酰‑tRNA合成酶突变库Lib‑NBDKRS;通过合成用于定点荧光标记的NBDK,进行筛选和验证。本发明基于NBDK的定点荧光标记方法达到了基于NBD在真核生物(哺乳动物细胞)中实现目的蛋白的红色荧光标记。 |
