基于7-羟基香豆素的定点荧光标记方法
基本信息
| 申请号 | CN201510957190.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN105541962B | 公开（公告）日 | 2021-04-02 |
| 申请公布号 | CN105541962B | 申请公布日 | 2021-04-02 |
| 分类号 | C07K1/13(2006.01)I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
| 发明人 | 张贯京;陈兴明;张少鹏;高伟明;李慧玲;潘延超 | 申请（专利权）人 | 深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司 |
| 代理机构 | - | 代理人 | - |
| 地址 | 518063广东省深圳市前海深港合作区前湾一路1号A栋201室（入驻深圳市前海商务秘书有限公司） | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种基于7‑羟基香豆素的定点荧光标记方法，通过合成M.Barkeri物种的吡咯赖氨酸氨酰‑tRNA合成酶(PylRS)的DNA序列，并将所述DNA序列连接到pBK质粒上；通过采用“饱和突变”的方法，构建了能够在原核和真核生物细胞中表达的M.Barkeri物种的吡咯赖氨酸氨酰‑tRNA合成酶突变库Lib‑CouKRS；通过合成用于定点荧光标记的7‑羟基香豆素赖氨酸，进行筛选和验证。本发明基于7‑羟基香豆素的定点荧光标记方法达到了基于7‑羟基香豆素在真核生物(哺乳动物细胞)中实现目的蛋白质的氨基酸序列的任意位点的荧光标记。 |
