利用原生质体转化构建黑根霉CPR基因工程菌的方法

基本信息

申请号 CN201310316876.2 申请日 -
公开(公告)号 CN103695455B 公开(公告)日 2016-04-13
申请公布号 CN103695455B 申请公布日 2016-04-13
分类号 C12N15/80(2006.01)I;C12N1/15(2006.01)I;C12N1/14(2006.01)I;C12R1/845(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陈小龙;顾光志;朱廷恒;嘉晓勤;范永仙;沈寅初 申请(专利权)人 台州仙琚药业有限公司
代理机构 杭州天正专利事务所有限公司 代理人 浙江工业大学;台州仙琚药业有限公司
地址 310014 浙江省杭州市下城区潮王路18号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种利用原生质体转化技术对黑根霉(Rhizopus?nigericans)进行外源基因的遗传转化方法:利用真菌细胞壁降解酶对黑根霉(Rhizopus?nigericans)的细胞壁进行处理,得到原生质体并进行纯化,以潮霉素B作为选择标记,首次将来自米根霉NADPH-细胞色素P450还原酶CYPOR(缩写:CPR基因)基因采用原生质体转化方法导入黑根霉中,获得工程菌。本发明的有益效果体现在:可以用于黑根霉的分子生物学研究,如研究该菌P450酶系基因对甾体化合物羟化作用的分子机制等;可以用来对黑根霉实施基因工程从而进行遗传改良育种,提高黑根霉对甾体底物羟化转化率。