一种分离型内含肽作为连接手段进行胞内合成BLA无痕索烃及其制备方法
基本信息
| 申请号 | CN202011618569.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114685678A | 公开（公告）日 | 2022-07-01 |
| 申请公布号 | CN114685678A | 申请公布日 | 2022-07-01 |
| 分类号 | C07K19/00（2006.01）I;C12N15/62（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
| 发明人 | 张文彬;王智辉 | 申请（专利权）人 | 北京大学 |
| 代理机构 | 无锡华源专利商标事务所（普通合伙） | 代理人 | - |
| 地址 | 214000江苏省无锡市锡山经济技术开发区芙蓉中三路99号瑞云5座507室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 一种分离型内含肽作为连接手段进行胞内合成BLA无痕索烃及其制备方法，属于蛋白质偶联技术领域。本发明的制备方法为：（1）基因质粒构建：将目标蛋白的N端和C端分别融合分离型内含肽的两部分IC与IN；经过反式剪切，IC与IN脱除实现目标蛋白质的首尾相连，唯一保留部分为实现反式剪切必需的氨基酸残基，得到内含肽基因卡带；（2）将步骤（1）中构建得叨叨额内含肽基因卡带引入载体质粒中；（3）在细胞中表达上述所述载体质粒；（4）对上述载体质粒进行蛋白表达与纯化，最终得到BLA无痕索烃。本发明无痕BLA索烃intX‑FL的催化速率以及催化能力都较好，最大程度减少融合成分、实现严格意义的主链环化提供极好的平台。 |
