一种人蜕膜MDSCs的分离方法
基本信息
申请号 | CN202210100915.4 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN114574438A | 公开(公告)日 | 2022-06-03 |
申请公布号 | CN114574438A | 申请公布日 | 2022-06-03 |
分类号 | C12N5/078(2010.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 胡雪梅;戚厚宝;李元焘;王玉 | 申请(专利权)人 | 滨州医学院 |
代理机构 | 北京和联顺知识产权代理有限公司 | 代理人 | - |
地址 | 256603山东省滨州市滨城区黄河三路522号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种人蜕膜MDSCs的分离方法,该分离方法包括步骤:蜕膜组织采集、蜕膜组织进一步清洗、剪碎、消化、终止消化、过滤、单个核细胞获得、细胞贴壁、收集未贴壁细胞、MDSCs分离和流式检测。本发明使用较温和的Ⅳ型胶原酶进行原代消化分离,与胰酶相比,胶原酶仅对细胞间质有消化作用,避免了胰酶消化时对细胞膜蛋白的破坏作用;消化过程中加入I型DNA酶防止DNA导致的细胞凝集,且对细胞无损伤;通过使用CD33磁珠分选获得高纯度的CD33+MDSCs,与流式分选相比,磁珠分选可以在短时间内获得大量高纯度的细胞,操作简单,避免长时间操作对细胞活性的影响和污染几率的增加。 |
