一种重组猫干扰素的制备方法
基本信息
申请号 | CN202110158299.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112695053A | 公开(公告)日 | 2021-04-23 |
申请公布号 | CN112695053A | 申请公布日 | 2021-04-23 |
分类号 | C12N15/70;C12N15/20;C12P21/02;C07K14/555;C07K1/14;C07K1/22;C07K1/34;C07K1/36 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 崔旻;刘皓轩 | 申请(专利权)人 | 武汉康湃特生物科技有限公司 |
代理机构 | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 徐绍新 |
地址 | 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种重组猫干扰素的制备方法,该方法通过优化猫ω干扰素的序列以及去除原有信号肽,构建原核表达重组质粒。经过培养携带该重组质粒的大肠杆菌获得种子液,接种菌液然后经低温诱导获得发酵菌液,经离心,破碎,收获上清可溶性蛋白,最后经过镍柱亲和层析和透析超滤获得猫干扰素。该方法的优势在于根据大肠杆菌密码子偏好进行序列优化,同时去除原核表达中不需要的信号肽以及采用低温诱导,提高了原本在包涵体中表达的蛋白的可溶性,进一步简化了纯化工艺并提高了蛋白活性。 |
