一种重组猫干扰素的制备方法

基本信息

申请号 CN202110158299.3 申请日 -
公开(公告)号 CN112695053A 公开(公告)日 2021-04-23
申请公布号 CN112695053A 申请公布日 2021-04-23
分类号 C12N15/70;C12N15/20;C12P21/02;C07K14/555;C07K1/14;C07K1/22;C07K1/34;C07K1/36 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 崔旻;刘皓轩 申请(专利权)人 武汉康湃特生物科技有限公司
代理机构 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 徐绍新
地址 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种重组猫干扰素的制备方法,该方法通过优化猫ω干扰素的序列以及去除原有信号肽,构建原核表达重组质粒。经过培养携带该重组质粒的大肠杆菌获得种子液,接种菌液然后经低温诱导获得发酵菌液,经离心,破碎,收获上清可溶性蛋白,最后经过镍柱亲和层析和透析超滤获得猫干扰素。该方法的优势在于根据大肠杆菌密码子偏好进行序列优化,同时去除原核表达中不需要的信号肽以及采用低温诱导,提高了原本在包涵体中表达的蛋白的可溶性,进一步简化了纯化工艺并提高了蛋白活性。