一种基于荧光素酶报告病毒的自噬细胞系构建方法
基本信息
| 申请号 | CN201811611086.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN109576227A | 公开（公告）日 | 2019-04-05 |
| 申请公布号 | CN109576227A | 申请公布日 | 2019-04-05 |
| 分类号 | C12N5/10（2006.01）I; C12N15/867（2006.01）I; C12N15/65（2006.01）I; C12N15/66（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 王雪根; 吕惠敏; 季雨 | 申请（专利权）人 | 江苏凯基生物技术股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京精金石知识产权代理有限公司 | 代理人 | 强红刚 |
| 地址 | 210008 江苏省南京市江宁区江宁科学园芝兰路18号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种基于荧光素酶报告病毒的自噬细胞系构建方法，该方法将AGT7启动子序列及LUC2基因整合入GTP载体上，并对该载体进行慢病毒包装，转染进入293T细胞，经抗性筛选，获得阳性细胞；利用超高速离心机浓缩获得高滴度的慢病毒。在此基础上，采用慢病毒侵染不同种类的细胞，通过荧光显微镜观察病毒转染效率，并通过基因检测验证侵染的细胞系中目的基因的表达。该方法构建的自噬相关的细胞系有助于研究化合物对细胞自噬的影响，为发育、衰老、细胞程序性死亡提供了新的研究思路和解决方案。 |
