一种质粒提取试剂盒及提取方法
基本信息
| 申请号 | CN202011179658.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112322612A | 公开（公告）日 | 2021-02-05 |
| 申请公布号 | CN112322612A | 申请公布日 | 2021-02-05 |
| 分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 孙益军;张峰;王雪根;李阳;韩斌 | 申请（专利权）人 | 江苏凯基生物技术股份有限公司 |
| 代理机构 | 江苏圣典律师事务所 | 代理人 | 肖明芳 |
| 地址 | 210008江苏省南京市江宁区江宁科学院芝兰路18号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种高纯度质粒提取试剂盒，其包括S I缓冲液、S II缓冲液、S III缓冲液、PS清洗液、洗脱缓冲液、TE 缓冲液以及新型离心柱，其中，S I缓冲液为1 M Tris‑HCl，0.5 M EDTA和1 M 葡萄糖，PH=8.0；S II缓冲液为2 M NaOH和10% SDS；S III缓冲液为3 M乙酸钾、2M盐酸胍和2M乙酸，PH=3.6‑4.2；PS清洗液为包含5‑10% TritonX‑114的异丙醇溶液；洗脱缓冲液为75%乙醇。本发明进一步提出了利用该试剂盒大量提取质粒的方法。本发明通过将新型离心柱与经典的强碱‑SDS裂解细菌细胞法结合起来使质粒DNA样品通过离心结合到纯化柱上，在一定条件下又能将质粒DNA充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化，整个过程无需酚氯仿抽提，可以获得高纯度质粒DNA，可满足真核细胞转染的使用。 |
