一种L 天冬氨酸氧化酶包涵体纯化复性方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种L 天冬氨酸氧化酶包涵体纯化复性方法

基本信息

申请号	CN201610864870.2	申请日	-
公开（公告）号	CN106636024A	公开（公告）日	2017-05-10
申请公布号	CN106636024A	申请公布日	2017-05-10
分类号	C12N9/06;C12N15/70	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	邹培建;王鹏举;张文宇;蒋溱;杨锦勋	申请（专利权）人	苏州埃德蒙生物技术有限公司
代理机构	南京苏科专利代理有限责任公司	代理人	姚姣阳
地址	215000 江苏省苏州市苏州太仓沙溪镇生物医药产业园
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种L 天冬氨酸氧化酶包涵体纯化复性方法，包括如下步骤：包涵体沉淀的收集,包涵体沉淀的充分洗涤，变性蛋白使用镍柱纯化,并通过将纯化的变性蛋白使用缓冲液D稀释至蛋白浓度低于1mg/ml，置于透析缓冲液中保持透析温度为4℃，透析12小时以上，离心收集上清。最后将上清使用超滤管浓缩，再通过分子筛纯化分离单体蛋白和聚集蛋白，获得均一的天然活性蛋白。本发明解决了L 天冬氨酸氧化酶复性的问题，使用方便快捷的方法进行L 天冬氨酸氧化酶的包涵体纯化以及复性，通过包涵体的漂洗以及镍柱纯化获得纯度较高的变性蛋白，通过一步透析复性过程，逐渐去掉变性剂，蛋白折叠为有活性的蛋白分子，复性效率不低于10%。然后经过一步透析和分子筛纯化获得有活性的高纯度酶。