一种L‑谷氨酸氧化酶‑CBD融合酶及其表达基因和应用

基本信息

申请号 CN201610864869.X 申请日 -
公开(公告)号 CN106479999A 公开(公告)日 2017-03-08
申请公布号 CN106479999A 申请公布日 2017-03-08
分类号 C12N9/42(2006.01)I;C12N9/06(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P7/50(2006.01)I;C12N11/12(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 邹培建;王鹏举;张文宇;蒋溱;杨锦勋 申请(专利权)人 苏州埃德蒙生物技术有限公司
代理机构 南京苏科专利代理有限责任公司 代理人 姚姣阳
地址 215000 江苏省苏州市苏州太仓沙溪镇生物医药产业园
法律状态 -

摘要

摘要 本发明具体揭示了一种L‑谷氨酸氧化酶‑CBD融合酶及其表达基因和应用,所述L‑谷氨酸氧化酶‑CBD基因的构建,以全基因合成的L‑谷氨酸氧化酶基因,设计引物,经PCR产物酶切,并用T4 DNA ligase连接构建pETM10‑CBD‑Gox,以E.coli BL21(DE3)为表达宿主,来实现L‑谷氨酸氧化酶‑CBD的高效表达。本发明的融合酶可以经过一步纯化操作,只需要将大肠杆菌经过简单的破碎处理,然后将融合蛋白固定到微晶纤维素上,具有结合特异性好、纯度高等特性。本发明中融合蛋白结合至微晶纤维素,可以通过纯水或者乙二醇进行洗脱,从而获得目的蛋白。