一种筛选酶切适配融合蛋白的方法及IGF-I制备方法
基本信息
| 申请号 | CN202010952359.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112111504A | 公开（公告）日 | 2020-12-22 |
| 申请公布号 | CN112111504A | 申请公布日 | 2020-12-22 |
| 分类号 | C12N15/62(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 汤华东;李冠霖;柳余莉;欧阳聪;杨薇;高思偲;尹领鹏;谢倩;杨琴霞;张盼盼 | 申请（专利权）人 | 武汉海特生物制药股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京汇泽知识产权代理有限公司 | 代理人 | 徐瑛 |
| 地址 | 430056湖北省武汉市经济技术开发区海特科技园（珠山湖大道66号） | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种筛选酶切适配融合蛋白的方法及IGF‑I制备方法，该筛选方法是将目标蛋白序列编码基因分别插入到多个不同的含蛋白酶酶切位点的表达载体中，获得多个不同融合蛋白的氨基酸序列；所得融合蛋白的氨基酸序列进行二级结构预测；将不同融合蛋白氨基酸序列及其对应的二级结构预测结果作为输入文件，预测三维结构；三维结构预测结果与该融合蛋白相对应的蛋白酶采用Cluspro算法进行分子对接，选择对接结果正确比例超过阈值的酶切体系进行实验验证，筛选出蛋白酶最适配的融合蛋白。通过上述方法筛选出适用于IGF‑I的凝血酶和HRV 3C蛋白酶可溶表达体系，具有稳定、可溶、高活性大量表达、酶切方便等优点。 |
