一种一次分离多个已知序列DNA片段的未知侧翼序列的方法

基本信息

申请号 CN201811171982.5 申请日 -
公开(公告)号 CN109295162B 公开(公告)日 2022-05-27
申请公布号 CN109295162B 申请公布日 2022-05-27
分类号 C12Q1/6806(2018.01)I;C12Q1/6869(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 常玉晓;刘可;赵胜;张会;汪泉 申请(专利权)人 中国农业科学院深圳农业基因组研究所(岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心)
代理机构 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 代理人 -
地址 518120广东省深圳市大鹏新区鹏飞路7号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种一次分离多个已知序列DNA片段的未知侧翼序列的方法。该方法巧妙利用了Tn5转座酶复合体可以在打断DNA的同时,将DNA接头连接到打断的DNA片段上的特性,理论上,基因组DNA只要能够被打断,其断点处都会被连接上DNA接头,连接DNA接头的效率近乎100%,远远高于反向PCR、接头PCR、TAIL‑PCR等同类技术,结合第二代高通量测序技术,可以同时分离一个样品中多个已知序列DNA片段的侧翼序列,而且可以从其左右两侧同时进行。对同一个已知序列DNA片段,同时从左右两端分离其侧翼序列,可以提高侧翼序列的分离效率,如果能够同时分离到其左右两侧的侧翼序列,它们可以互相验证,提高准确度。