能应用于互作蛋白筛选的在植物细胞中完整表达的改造的DH5α BirA基因及其构建方法

基本信息

申请号 CN201610890716.2 申请日 -
公开(公告)号 CN106480071A 公开(公告)日 2017-03-08
申请公布号 CN106480071A 申请公布日 2017-03-08
分类号 C12N15/52(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李洪清;林秋鹏;赵波 申请(专利权)人 中佳源物种(深圳)生物科技有限公司
代理机构 北京市立方律师事务所 代理人 华南师范大学
地址 510631 广东省广州市中山大道西55号华南师范大学生命科学学院
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开一种能在植物细胞中完整表达的改造的DH5αBirA基因,所述改造的DH5αBirA基因与野生的DH5αBirA基因的差异在于第118位氨基酸(由R变成G),以及剪接识别位点的AG区域。还公开一种重组真核表达载体,其包含如前所述的改造的DH5αBirA基因。还公开一种如前所述的重组真核表达载体的构建方法,其包括以下步骤:获得野生的DH5αBirA基因;对所述野生的DH5αBirA基因的第352位碱基的突变,以及对可变剪接的剪切位点进行点突变,以获得能完整表达的改造的DH5αBirA基因,命名为BirAG基因。所述改造的BirAG基因及其构建方法为检测蛋白质相互作用技术实现条件。本发明改造的BirAG基因能在植物细胞中完整表达,与目的基因融合后在植物中表达可以生物素化与目的基因互作的植物蛋白。本发明是一种有效的筛选植物互作蛋白的方法。