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重组CHO细胞的贴壁微载体悬浮培养方法

基本信息

申请号	CN201710851893.4	申请日	-
公开（公告）号	CN107523534B	公开（公告）日	2020-10-02
申请公布号	CN107523534B	申请公布日	2020-10-02
分类号	C12N5/071	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	付立家;付建家;马筠;赵敏姿	申请（专利权）人	安国昭进生物制药有限公司
代理机构	北京路浩知识产权代理有限公司	代理人	王文君;王璐
地址	102200 北京市昌平区科技园区振兴路8号
法律状态	-

摘要

本发明涉及细胞培养领域，具体公开了一种重组CHO细胞的贴壁微载体悬浮培养方法，包括如下步骤：（1）使用细胞生长液对重组CHO细胞进行传代培养，将传代培养后的重组CHO细胞，按照1～5×105个细胞/mL的接种量接种至带有微载体的生物反应器；（2）进行重组CHO细胞的扩增培养；（3）当重组CHO细胞表达的目的蛋白含量≥0.5mg/L时，每天流加细胞生长液；1周后，每天流加细胞维持液；培养时间为25～30天；其中，所述细胞生长液为含有10％～16％新生牛血清的DMEM培养基；所述细胞维持液为含有4％～8％新生牛血清的DMEM培养基。本发明采用贴壁微载体悬浮培养方法，并使用所述细胞生长液和细胞维持液对重组CHO细胞进行培养，表达目的蛋白，可显著提高目的蛋白的产量。