一种从微量脂肪中高效获得脂肪间充质干细胞的方法

基本信息

申请号 CN202110812090.4 申请日 -
公开(公告)号 CN113416694A 公开(公告)日 2021-09-21
申请公布号 CN113416694A 申请公布日 2021-09-21
分类号 C12N5/0775(2010.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 焦阳;张勇;王铁;朱迪·德瓦库玛;杨丽华;李靖 申请(专利权)人 江苏瑞思坦生物科技有限公司
代理机构 无锡睿升知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 张悦
地址 215000江苏省苏州市吴中区经济开发区越溪街道吴中大道2588号5幢521室、523室、428室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种从微量脂肪中高效获得脂肪间充质干细胞的方法,包括以下步骤:微量脂肪采集;原代制备脂肪间充质干细胞;洗涤脂肪组织;使用不同的消化酶对脂肪组织进行两步消化;将消化后的细胞离心;加入完全培养基,重悬细胞沉淀,之后接种至包被好的培养瓶中进行培养;脂肪间充质干细胞的传代;润洗培养之后的脂肪细胞;加入胰蛋白酶消化脂肪细胞,至脂肪细胞在显微镜下由梭性贴壁状变为圆形脱壁状态,加入DMEM终止消化;之后将细胞悬液转移至离心管中离心;将离心管底部的细胞加入完全培养基,重悬细胞沉淀,接种至培养瓶中进行培养;传代培养细胞。本发明使用的脂肪量极少,同时不影响细胞的最终得率。