一种自杀他杀式质粒、利用其的酿酒酵母无痕基因编辑方法及应用
基本信息
| 申请号 | CN202010456216.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111471720A | 公开（公告）日 | 2020-07-31 |
| 申请公布号 | CN111471720A | 申请公布日 | 2020-07-31 |
| 分类号 | C12N15/90(2006.01)I | 分类 | - |
| 发明人 | 朱佑民;陶小倩;程倩;王梓旭;邢妍婧;赵一凡;柳伟强;杨平 | 申请（专利权）人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京品源专利代理有限公司 | 代理人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 地址 | 215123江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园C20栋 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种自杀他杀式质粒、利用其的酿酒酵母无痕基因编辑方法及应用。所述自杀他杀式质粒包括复制起点、筛选标记、Cas9蛋白表达框和sgRNA1表达框；所述sgRNA1表达框包含启动子、针对基因编辑载体和所述自杀他杀式质粒的共同序列设计的sgRNA1、scaffold和终止序列。将基因编辑载体转入酿酒酵母中，再转入所述自杀他杀式质粒，即可得到无痕编辑后的酿酒酵母菌株。利用所述自杀他杀式质粒编辑酿酒酵母，既不影响基因编辑后对成功转化基因编辑质粒的菌株进行选择，又显著提高了消除质粒成功率；同时，经过两轮质粒转化即可达到无痕编辑的效果，进一步加快了酿酒酵母无痕编辑的速率。 |
