一种超大质粒构建试剂盒、超大质粒构建方法及其应用

基本信息

申请号 CN201911380387.7 申请日 -
公开(公告)号 CN111004813A 公开(公告)日 2020-04-14
申请公布号 CN111004813A 申请公布日 2020-04-14
分类号 C12N15/70(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 朱佑民;杨平;孙健;柳伟强;刘敏祥;严成丽;邢妍婧;赵一凡 申请(专利权)人 苏州泓迅生物科技股份有限公司
代理机构 北京品源专利代理有限公司 代理人 苏州泓迅生物科技股份有限公司
地址 215123江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园C20楼101单元
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种超大质粒构建试剂盒、超大质粒构建方法及其应用,所述试剂盒包括待组装的DNA片段Fn和载体;所述载体包括中间载体和/或组装载体;所述试剂盒还包括λ噬菌体Red重组系统。本发明采用体外组装和体内组装相结合的方式,首先采用重组酶体系将大片段DNA与组装载体在体外进行组装,再将体外组装产物和λ噬菌体Red重组系统同时转化入大肠杆菌进行体内组装,构建的试剂盒结合了体外组装和体内组装的优点,并采用λ噬菌体Red重组系统增强大肠杆菌的体内组装能力,加快了超大质粒合成速率,显著提高了超大质粒的合成成功率。