一种超大质粒构建试剂盒、超大质粒构建方法及其应用
基本信息
申请号 | CN201911380387.7 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111004813A | 公开(公告)日 | 2020-04-14 |
申请公布号 | CN111004813A | 申请公布日 | 2020-04-14 |
分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 朱佑民;杨平;孙健;柳伟强;刘敏祥;严成丽;邢妍婧;赵一凡 | 申请(专利权)人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
代理机构 | 北京品源专利代理有限公司 | 代理人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
地址 | 215123江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园C20楼101单元 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明提供了一种超大质粒构建试剂盒、超大质粒构建方法及其应用,所述试剂盒包括待组装的DNA片段Fn和载体;所述载体包括中间载体和/或组装载体;所述试剂盒还包括λ噬菌体Red重组系统。本发明采用体外组装和体内组装相结合的方式,首先采用重组酶体系将大片段DNA与组装载体在体外进行组装,再将体外组装产物和λ噬菌体Red重组系统同时转化入大肠杆菌进行体内组装,构建的试剂盒结合了体外组装和体内组装的优点,并采用λ噬菌体Red重组系统增强大肠杆菌的体内组装能力,加快了超大质粒合成速率,显著提高了超大质粒的合成成功率。 |
