一种质粒构建试剂盒、质粒构建方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN201911380365.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110982834A | 公开（公告）日 | 2020-04-10 |
| 申请公布号 | CN110982834A | 申请公布日 | 2020-04-10 |
| 分类号 | C12N15/70;C12N15/64 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 朱佑民;杨平;孙健;柳伟强;刘敏祥;严成丽;邢妍婧;赵一凡 | 申请（专利权）人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京品源专利代理有限公司 | 代理人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 地址 | 215123 江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园C20楼101单元 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种质粒构建试剂盒、质粒构建方法及其应用，所述试剂盒包括待组装的DNA片段Fn和载体；所述载体包括中间载体和/或组装载体；所述试剂盒还包括大肠杆菌，所述大肠杆菌含有λ噬菌体Red重组系统的质粒。本发明采用体外组装和体内组装相结合的方式，首先采用重组酶体系将大片段DNA与组装载体在体外进行组装，再将体外组装产物转化入含有λ噬菌体Red重组系统质粒的大肠杆菌中进行体内组装，构建的试剂盒结合了体外组装和体内组装的优点，并采用λ噬菌体Red重组系统增强大肠杆菌的体内组装能力，加快了质粒合成速率，显著提高了质粒的合成成功率。 |
