一种双sgRNA无痕基因编辑质粒及其制备方法和应用
基本信息
| 申请号 | CN202010525391.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111621512A | 公开（公告）日 | 2020-09-04 |
| 申请公布号 | CN111621512A | 申请公布日 | 2020-09-04 |
| 分类号 | C12N15/81(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 朱佑民;程倩;王梓旭;陶小倩;杨平;柳伟强;邢妍婧;赵一凡 | 申请（专利权）人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京品源专利代理有限公司 | 代理人 | 苏州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 地址 | 215123江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园C20栋 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种双sgRNA无痕基因编辑质粒及其制备方法和应用，所述质粒包括Cas9蛋白表达框和双sgRNA表达框；所述双sgRNA包括宿主基因编辑sgRNA和质粒基因编辑sgRNA。本发明设计含有双sgRNA的质粒对宿主进行基因编辑，所述双sgRNA的其中一条sgRNA用于对宿主进行基因编辑，另一条sgRNA用于消除质粒，实现了在对宿主进行基因编辑的同时消除基因编辑质粒的目的，不会因Cas9蛋白的持续表达而提高脱靶率，也不影响后续实验，将该质粒转化入酿酒酵母进行基因编辑，显著提高了酿酒酵母无痕编辑的效率。 |
