从组织中分离胎盘间质细胞并培养成间充质干细胞的方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

从组织中分离胎盘间质细胞并培养成间充质干细胞的方法

基本信息

申请号	CN201710653583.1	申请日	-
公开（公告）号	CN107299082B	公开（公告）日	2017-10-27
申请公布号	CN107299082B	申请公布日	2017-10-27
分类号	C12N5/0775(2010.01)I	分类	-
发明人	许晓椿;陆晗燕;王正;朱业峰	申请（专利权）人	广州中科博雅干细胞科技有限公司
代理机构	-	代理人	-
地址	510663广东省广州市高新技术产业开发区科丰路31号G2栋520号
法律状态	-

摘要

本发明涉及从组织中分离胎盘间质细胞并培养成间充质干细胞的方法，还涉及该方法中所用的混合酶消化液。具体的，所述方法包括以下步骤：胎盘小叶的处理、混合酶消化及终止、收集原代细胞、原代细胞冻存、细胞复苏、和细胞传代等步骤。使用本发明方法可以有效的提高从胎盘分离间充质干细胞的效率。例如所得原代细胞是一群较纯的间质细胞(CD73表达大于60％，CD45不表达)，每克组织获取细胞数可达2.5×107，且得率稳定，经传代培养所得间充质干细胞的P1‑P5代细胞均为间充质干细胞，阳性表达CD73、CD90、CD105大于98％，阴性表达CD34、CD45、CD19、CD11b、HLA‑DR小于2％；P5代细胞G2期细胞小于1％，增殖能力强，未进入分裂期；在特异性诱导培养基刺激下，有向成骨细胞，成脂细胞，成软骨细胞分化的能力。