人类卵泡卵丘细胞或/和颗粒细胞的细胞系及其制备方法

基本信息

申请号 CN202110090935.3 申请日 -
公开(公告)号 CN112646771A 公开(公告)日 2021-04-13
申请公布号 CN112646771A 申请公布日 2021-04-13
分类号 C12N5/071;C12R1/91 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 千日成;高二梦 申请(专利权)人 艾尔斯(浙江)医学科技有限公司
代理机构 北京众达德权知识产权代理有限公司 代理人 江慧
地址 314000 浙江省嘉兴市南湖区凌公塘路3339号(嘉兴科技城)1号楼190室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明实施例公开了一种人类卵泡卵丘细胞或/和壁颗粒细胞的细胞系及其制备方法,包括:将人类卵泡卵丘细胞或/和壁颗粒细胞分别进行第一离心获得第一固体;将梯度离心培养液加入到第一固体中,第二离心后分成三层,取所述三层的中间层加入磷酸盐缓冲液第三离心获得第三固体,后加入透明质酸酶溶液、裂解缓冲液,第四离心获得第四固体加入磷酸盐缓冲液第五离心获得纯化细胞,加入培养液中传代培养获得人类卵泡卵丘细胞或/和壁颗粒细胞的细胞系;培养液按体积份数计包括:α‑MEM或DMEM100份;胎牛血清5‑15份;青链霉素0.5‑1.5份;促卵泡生长激素0.012‑0.02份;成功获得人类卵泡卵丘细胞或/和颗粒细胞的细胞系。