一种动物血液中超氧化物歧化酶提取技术新工艺
基本信息
申请号 | CN201310307979.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN103397003B | 公开(公告)日 | 2015-10-21 |
申请公布号 | CN103397003B | 申请公布日 | 2015-10-21 |
分类号 | C12N9/02(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 孟俊祥;米春阳;张守石;王俊武;周倩;凌云霄;吴跃德;高振宏;夏毅强;程榆铭;王建军 | 申请(专利权)人 | 南京宝迪农业科技有限公司 |
代理机构 | 南京众联专利代理有限公司 | 代理人 | 安徽小岗宝迪种猪科技有限公司 |
地址 | 233124 安徽省滁州市凤阳县小溪河镇小岗村 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种动物血液中超氧化物歧化酶提取技术新工艺,其特征在于,所述工艺包括以下步骤,(1)分离血球,(2)除血红蛋白,(3)热变性,上清液加热到65℃,保温10min,然后迅速冷却到室温,3000r/min离心20min,弃去沉淀物,收集上清液;(4)沉淀,清液在盐冰浴中冷却,然后在-5℃以下的操作温度下,加入1.5倍量预冷丙酮,边加边搅拌均匀,即有白色沉淀产生,(5)SOD的纯化,采用热变性—等电点—丙酮分级沉淀合用的方法,首先将SOD粗提液先在55℃下处理15min,然后调节pH值至其等电点3~4,最后加入终体积为1.0%的丙酮,收集沉淀。向沉淀中加入去离子水,溶液即为SOD提纯液;采用DEAE?Sepha-dexA-50层析柱进行纯化,纯化产物即为SOD精品液。 |
