一种培养HEK-293T细胞株高效分泌表达猪瘟E2蛋白的方法及应用
基本信息
| 申请号 | CN201811419636.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN109468268B | 公开（公告）日 | 2019-03-15 |
| 申请公布号 | CN109468268B | 申请公布日 | 2019-03-15 |
| 分类号 | C12N5/073(2010.01)I | 分类 | - |
| 发明人 | 颜仁和;王升尧;李红卫;高永新;李安迪;万鹏飞 | 申请（专利权）人 | 广州伯尼兹生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 | 代理人 | 胡辉;舒胜英 |
| 地址 | 510663广东省广州市高新技术开发区科学城揽月路3号广州国际企业孵化器F区F521 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种培养HEK‑293T细胞株高效分泌表达猪瘟E2蛋白的方法，该方法为细胞生物反应器加入含血清培养基，再接种HEK‑293T细胞，将培养基先低速循环、再高速循环后检测葡萄糖浓度；每隔22‑26h检测细胞耗糖，当残糖低于2g/L时，添加葡萄糖至3.8～4.2g/L；当每天糖耗超过1.5g/L时，去除培养基，加入无血清培养基；根据细胞耗糖量，补加葡萄糖；每隔4‑5天收集部分体积，并补回新的无血清培养基。本发明通过优化各个参数，一次实验最多可以收集15批次表达蛋白，产能高。且培养条件稳定，重复性高。本发明方法使得培养的细胞密度高，表达量高。单位疫苗制作成本低，性价比高，应用前景大。 |
