判断PCR结果是否为假阳性的方法

基本信息

申请号 CN201711498072.3 申请日 -
公开(公告)号 CN108085371B 公开(公告)日 2021-11-02
申请公布号 CN108085371B 申请公布日 2021-11-02
分类号 C12Q1/6848(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李阳 申请(专利权)人 武汉艾德士生物科技有限公司
代理机构 南京纵横知识产权代理有限公司 代理人 董建林;徐瑛
地址 430000湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发大楼B1栋
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开一种判断PCR结果是否为假阳性的方法,先估算出在PCR体系内将要加入的目标基因模板分子数量;然后根据目标基因模板分子数量向PCR体系内添加内参模板,所述内参模板的分子数量控制在目标基因模板分子数量的1/n;所述内参模板和目标基因模板高度同源,使得PCR引物能够以相同效率扩增内参模板和目标基因模板,然后对扩增结果进行测序分析;当扩增结果以目标基因片段为主,说明样品为阳性;当扩增结果以内参模板为主,则说明样品为阴性。本发明根据目标基因模板分子数量加入适量的内参模板,一方面能够压制污染信号,其抗污染能力可以达到Southern blot的级别,另一方面,本发明通过简单的PCR技术就可以对转基因阳性进行鉴定,可信度高,成本低廉。