判断PCR结果是否为假阳性的方法
基本信息
申请号 | CN201711498072.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN108085371B | 公开(公告)日 | 2021-11-02 |
申请公布号 | CN108085371B | 申请公布日 | 2021-11-02 |
分类号 | C12Q1/6848(2018.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 李阳 | 申请(专利权)人 | 武汉艾德士生物科技有限公司 |
代理机构 | 南京纵横知识产权代理有限公司 | 代理人 | 董建林;徐瑛 |
地址 | 430000湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发大楼B1栋 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开一种判断PCR结果是否为假阳性的方法,先估算出在PCR体系内将要加入的目标基因模板分子数量;然后根据目标基因模板分子数量向PCR体系内添加内参模板,所述内参模板的分子数量控制在目标基因模板分子数量的1/n;所述内参模板和目标基因模板高度同源,使得PCR引物能够以相同效率扩增内参模板和目标基因模板,然后对扩增结果进行测序分析;当扩增结果以目标基因片段为主,说明样品为阳性;当扩增结果以内参模板为主,则说明样品为阴性。本发明根据目标基因模板分子数量加入适量的内参模板,一方面能够压制污染信号,其抗污染能力可以达到Southern blot的级别,另一方面,本发明通过简单的PCR技术就可以对转基因阳性进行鉴定,可信度高,成本低廉。 |
