高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法、相关CIK细胞及应用
基本信息
| 申请号 | CN201210324368.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN102827809A | 公开（公告）日 | 2012-12-19 |
| 申请公布号 | CN102827809A | 申请公布日 | 2012-12-19 |
| 分类号 | C12N5/0783(2010.01)I;C12N5/0786(2010.01)I;A61K35/14(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P31/00(2006.01)I;A61P37/02(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 凌丹彦;戴书缙 | 申请（专利权）人 | 上海易美生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人 | 王洁;郑暄 |
| 地址 | 200032 上海市徐汇区斜土路1223号之俊大厦2402室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法，包括以下步骤：（1）将外周血单个核细胞分选去除CD4+CD25+Treg细胞，得到CIK前期细胞；（2）将CIK前期细胞置于含有100ng/ml?PHA、100ng/ml?IL-6、10ng/ml?PGE2的细胞培养液中培养24小时；（3）转移至经1ug/ml?CD3单抗包被的细胞培养瓶中，加入1000U/ml?IFN-γ培养48小时；（4）加入1000U/ml?IL-2以及100ng/ml?IL-1α培养4天；（5）加入1ug/ml胰岛素继续培养7-14天。还提供了相关的CIK细胞及应用、抑制外周血单个核细胞向CD4+CD25+Treg细胞分化的方法及促进CIK细胞增殖的方法。本发明的CIK细胞制备方法设计巧妙，制备得到的肿瘤杀伤细胞-CIK细胞具有较强的增殖能力，较高的毒活性，具有更佳的肿瘤杀伤效率，提高临床疗效，适于大规模推广应用。 |
