一种表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法
基本信息
申请号 | CN201110339604.5 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN102358889B | 公开(公告)日 | 2013-07-17 |
申请公布号 | CN102358889B | 申请公布日 | 2013-07-17 |
分类号 | C12N1/21(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 牛春;周敏毅;刘金毅;程永庆 | 申请(专利权)人 | 北京毕艾欧科技发展有限责任公司 |
代理机构 | - | 代理人 | - |
地址 | 102600 北京市大兴区北臧村镇北京生物工程与医药产业基地天富大街九号北京三元基因工程有限公司 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于生物医药领域,涉及表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法,按顺序包括如下步骤:1)获得表达苯丙氨酸解氨酶的基因;2)将表达苯丙氨酸解氨酶的基因与适于转化乳酸乳球菌的表达载体相连接形成重组表达载体;3)将重组表达载体转化感受态的乳酸乳球菌;4)筛选获得高效表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌菌株;5)发酵乳酸乳球菌并诱导表达苯丙氨酸解氨酶;6)干燥发酵收获的菌体,其中在5)的发酵的诱导前调节发酵液的pH为6.0-6.5进行培养,诱导后将pH调节到6.5-7.5继续培养直至发酵结束。采用本发明的技术方案可使获得的乳酸乳球菌活菌数和其中苯丙氨酸解氨酶的比活力大幅提高,其中前者可达到1012CFU/ml以上,后者可达到80U/g以上。 |
