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重组人寡腺苷酸合成酶-1的制备方法

基本信息

申请号	CN201110337751.9	申请日	-
公开（公告）号	CN102358897B	公开（公告）日	2013-02-13
申请公布号	CN102358897B	申请公布日	2013-02-13
分类号	C12N9/12(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	周敏毅;李孜;徐晨;刘金毅;程永庆	申请（专利权）人	北京毕艾欧科技发展有限责任公司
代理机构	-	代理人	-
地址	102600 北京市大兴区北臧村镇北京生物工程与医药产业基地天富大街九号北京三元基因工程有限公司
法律状态	-

摘要

本发明属于生物医药领域，涉及重组人寡腺苷酸合成酶-1（OAS1）的制备方法，依次包括步骤：1）化学合成OAS1蛋白基因表达序列；2）构建表达OAS1蛋白的重组工程菌；3）发酵培养产生包涵体形式表达的OAS1；4）获得包涵体并对其依次用含从低到高浓度的1-8mol/L的尿素的溶液进行洗涤，含每种浓度的尿素的溶液洗涤1次，共洗涤2-4次后用含6-8mol/L盐酸胍与同下步阳离子交换层析相同缓冲溶液体系的溶液进行变性处理；5）变性液上阳离子交换层析柱进行纯化处理，洗脱后得到纯度在95%以上的OAS1变性蛋白。采用该方法可在不添加有利于纯化的标签的情况下通过一步纯化原核表达系统表达的OAS1蛋白，使其纯度达到95%以上，更好的符合免疫与筛选抗体的需要。