一种人脐带间充质干细胞的分离培养扩增方法及系统

基本信息

申请号 CN202110669236.4 申请日 -
公开(公告)号 CN113249317A 公开(公告)日 2021-08-13
申请公布号 CN113249317A 申请公布日 2021-08-13
分类号 C12N5/0775;C12Q1/686;C12M3/00;C12M1/34;C12M1/26;G01N15/14 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 马浩天;武威 申请(专利权)人 北京国卫生物科技有限公司
代理机构 重庆百润洪知识产权代理有限公司 代理人 郝艳平
地址 100000 北京市经济技术开发区经海五路58号院9幢6层602室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提出了一种脐带间充质干细胞分离培养扩增方法及系统,包括,步骤一:样本预处理,步骤二:华通氏胶的获取,将华通氏胶剪成小块组织,加入体积为所述小块组织体积的3.5倍的过滤后的红细胞裂解缓冲液,步骤三:胶原酶消化,所述消化溶液是包含1%IV型胶原酶、0.5%透明质酸酶、300U/mlDNA酶和2%血清替代物的平衡盐溶液;步骤四:原代细胞分离培养,添加间充质干细胞的无血清培养基以得到细胞悬浮液,加入脐带间充质干细胞专用原代细胞培养液进行原代培养;步骤五:细胞传代培养,使用0.215%的质量百分比浓度的胰蛋白酶,将收集的细胞按照5000个/cm2接种;步骤六:将脐带间充质干细胞收集后进行成骨分化、成脂分化和成软骨分化实验。