一种痰液微生物宏基因组去宿主化提取和建库方法

基本信息

申请号 CN201711397653.8 申请日 -
公开(公告)号 CN108048450B 公开(公告)日 2021-10-29
申请公布号 CN108048450B 申请公布日 2021-10-29
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12N1/06(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 伍泳彰;陈杰 申请(专利权)人 湖南赛哲智造科技有限公司
代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 代理人 单香杰
地址 410036 湖南省长沙市岳麓区学士街道学士路336号湖南省检验检测特色产业园A9栋一层、六层、七层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于微生物分子生物学检测技术领域,具体公开了一种痰液微生物宏基因组去宿主化提取方法,包括第一次痰液液化、第二次痰液液化、微生物破壁、DNA提取和核酸质量检测等步骤。本发明还公开了一种痰液微生物宏基因组建库方法,包括样品基因组DNA提取、基因组DNA处理、文库扩增、文库初纯化、两步法片段选择和上机检测等步骤。本发明采用胰蛋白酶和SDS联合的温柔型消化法,将宿主基因组释放于溶液中,获得保留完整细胞壁结构的微生物,实现去宿主化微生物核酸提取。本发明所提供的提取方法及建库方法兼容性好,可广泛用于主流测序平台,具有灵活简便、高效快捷、节约成本的优点,具有较好的推广应用前景。