楸树内生真菌的原生质体的制备方法

基本信息

申请号 CN201410016834.1 申请日 -
公开(公告)号 CN103756917B 公开(公告)日 2016-05-04
申请公布号 CN103756917B 申请公布日 2016-05-04
分类号 C12N1/14(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 苗志奇;陈榕华;朱闪烁;于湘莉;唐克轩 申请(专利权)人 成都上交致远生物科技有限公司
代理机构 上海汉声知识产权代理有限公司 代理人 上海交通大学;上海交大知识产权管理有限公司;唐克轩;成都上交致远生物科技有限公司
地址 200240 上海市闵行区东川路800号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种楸树内生真菌的原生质体的制备方法;所述方法包括以下步骤:步骤1,菌丝体的制备;步骤2,原生质体的制备;步骤3,原生质体纯化;步骤4,原生质体再生。本发明所述方法制备的原生质体数量较多,可达到6×107个/毫克菌丝,获得的原生质体的活力较高,再生率可达到1.2%。本发明选择培养12-24h的菌丝体,真菌处于快速生长期,生长快,细胞壁易于酶的裂解,释放出的原生质体的数量多,不易裂解,活力高。本发明选取5~30mg/ml?Glucanex复合酶作为细胞壁裂解酶液,裂解效率高,原生质体释放数量多。本发明选用KCl或NaCl作为渗透压稳定剂,保证了原生质体制备数量与原生质体的稳定。