一种FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶的高产发酵方法
基本信息
| 申请号 | CN202110955924.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113637649A | 公开（公告）日 | 2021-11-12 |
| 申请公布号 | CN113637649A | 申请公布日 | 2021-11-12 |
| 分类号 | C12N9/04（2006.01）I;C12N1/16（2006.01）I;C12R1/84（2006.01）N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 陈文嘉;李因来 | 申请（专利权）人 | 杭州博岳生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 深圳紫晴专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 张欢欢 |
| 地址 | 310018浙江省杭州市钱塘新区和享科技中心3幢701、702室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶的高产发酵方法，属于生物工程技术领域，包括如下步骤：1）取‑80℃冻存的表达菌种，无菌操作条件下接种至种子培养基中，种子培养基为BMGY培养基或者为YPD培养基，种子培养使用500ml或者1L三刺三角摇瓶，装液量250ml～500ml，接种量0.5‰～1.5‰，接种后在摇床中30℃250rpm培养16～24小时至OD600达到6～10；本发明通过使用重组毕赤酵母菌在10L发酵罐中培养时经过60小时的诱导，培养基上清中表达的葡萄糖脱氢酶酶活达到1150000U/L（DCPIP比色法测定值）,酶活得率提高了4.4～4.5倍，并且诱导时间仅需60小时，比现有技术所使用的诱导时间缩短了三分之一甚至近一半，解决了现有技术发酵时间长、酶活得率低、不利于大规模工业化放大生产的问题。 |
