一种包含重叠开放阅读框的基因的表达盒及其在昆虫细胞中的应用

基本信息

申请号 CN202111425804.2 申请日 -
公开(公告)号 CN114150021A 公开(公告)日 2022-03-08
申请公布号 CN114150021A 申请公布日 2022-03-08
分类号 C12N15/866(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/35(2006.01)I;C07K14/015(2006.01)I;C12N7/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 不公告发明人 申请(专利权)人 劲帆生物医药科技(武汉)有限公司
代理机构 武汉华之喻知识产权代理有限公司 代理人 彭翠;曹葆青
地址 430223 湖北省武汉市东湖新技术开发区光谷七路128号核磁波谱仪产业基地实验楼311-22(自贸区武汉片区)
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于基因工程领域,公开一种包含重叠开放阅读框的基因的表达盒及其在昆虫细胞中的应用,该表达盒包含从5’至3’的、可操作连接的:能够在昆虫细胞中驱动转录的启动子;人工构建序列;仅缺少第一个翻译起始密码子的重叠开放阅读框;其中,人工构建序列包含在昆虫细胞中有剪接活性的第一内含子和第二内含子,第一内含子和第二内含子共用5’部分或3’部分,人工构建序列中不含翻译起始密码子;在转录后加工过程中,通过第一内含子和第二内含子的选择性剪接作用,能够形成翻译起始密码子AUG。本发明利用内含子选择性剪接作用,调控不同衣壳蛋白以及不同Rep蛋白的相对表达,可在昆虫细胞中大规模生产具有高包装率和感染性的rAAV。