一种用于在昆虫细胞中表达包含重叠开放阅读框的基因的表达盒及其应用

基本信息

申请号 CN202111105263.5 申请日 -
公开(公告)号 CN113897396A 公开(公告)日 2022-01-07
申请公布号 CN113897396A 申请公布日 2022-01-07
分类号 C12N15/866(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 不公告发明人 申请(专利权)人 劲帆生物医药科技(武汉)有限公司
代理机构 武汉华之喻知识产权代理有限公司 代理人 彭翠;曹葆青
地址 430223 湖北省武汉市东湖新技术开发区光谷七路128号核磁波谱仪产业基地实验楼311-22(自贸区武汉片区)
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种用于在昆虫细胞中表达包含重叠开放阅读框的基因的表达盒及其应用,该表达盒包含从5’至3’的、可操作连接的:能够在昆虫细胞中驱动转录的启动子;人工构建序列;仅缺少第一个翻译起始密码子的重叠开放阅读框;其中,人工构建序列包含在昆虫细胞中有剪接活性的天然的或经过人工改造的内含子,内含子中包含ATG,或者内含子位于ATG中任意相邻两个核苷酸之间。本发明包含该表达盒的重组腺相关病毒载体利用设计的内含子序列,通过内含子剪接作用,调控VP1、VP2和VP3蛋白相对表达,以及Rep78和Rep52蛋白的相对表达,可在昆虫细胞中大规模生产具有高包装率和感染性的rAAV。