高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株的培养方法及其应用
基本信息
申请号 | CN201710687334.4 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN107974432B | 公开(公告)日 | 2021-04-23 |
申请公布号 | CN107974432B | 申请公布日 | 2021-04-23 |
分类号 | C12N5/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 钱泓;吴有强;卞广林;吴素芳;车影;查银河 | 申请(专利权)人 | 浙江海隆生物科技有限公司 |
代理机构 | 北京乾诚五洲知识产权代理有限责任公司 | 代理人 | 付晓青;李广文 |
地址 | 312000浙江省绍兴市滨海新城马欢路398号科创中心2号楼5楼 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株的培养方法及其应用,所述的培养方法包括以下步骤:1)将高效分泌表达猪瘟E2蛋白的CHO细胞株在1号培养基中逐级放大培养;2)将放大培养后的细胞转入生物反应器中进行发酵培养,在2号培养基中进行搅拌培养,发酵培养初期培养温度为36.5~37.5℃,pH为7.05~7.25,从发酵培养的120±2h开始,将培养温度下调至31.5~32.5℃,并将pH下调至6.90~7.10;在整个发酵培养的过程中,控制溶氧为20%~60%;在生物反应器中发酵的第12天后,收获细胞发酵液。本发明的培养方法获得的猪瘟E2蛋白产高、且具有更好的可操作性和实用性,因此,本发明更有利于扩大培养规模。 |
