一种ARMS-TaqManBlocker体系的Blocker设计和筛选方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种ARMS-TaqManBlocker体系的Blocker设计和筛选方法

基本信息

申请号	CN202011295178.5	申请日	-
公开（公告）号	CN112375808A	公开（公告）日	2021-02-19
申请公布号	CN112375808A	申请公布日	2021-02-19
分类号	C12Q1/6811(2018.01)I;	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	杨芳梅;徐红梅	申请（专利权）人	合肥欧创基因生物科技有限公司
代理机构	合肥律众知识产权代理有限公司	代理人	赵娟
地址	230000安徽省合肥市高新区创新大道106号明珠产业园3#5层D区
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种ARMS‑TaqMan Blocker体系的Blocker设计和筛选方法，设计方法将Blocker设计在突变位点处，覆盖突变位点即可；Blocker与野生型模板完全匹配，完全匹配的Tm值高于ARMS引物与野生型模板匹配的Tm值，允许熔点差低于5℃；Blocker与突变型模板不完全匹配，不完全匹配的Tm值与ARMS引物跟突变型模板的Tm值一致或接近；Blocker的3’末端添加多个与模板不匹配的无关碱基；筛选方法为，按照上述Blocker设计原则设计3‑10条Blocker，使这些Blocker与突变型模板匹配的Tm值在ARMS引物跟突变型模板匹配的Tm值附近呈现逐步升高的梯度，然后经实时PCR验证梯度Blocker对体系灵敏度和特异性的影响，筛选出对灵敏度无影响且特异性最好的Blocker。本发明提供的Blocker设计和筛选方法降低成本的同时，提升了体系的特异性。