一种高通量检测探针及其熔解曲线检测方法及其应用

基本信息

申请号 CN201910796967.8 申请日 -
公开(公告)号 CN110438124A 公开(公告)日 2019-11-12
申请公布号 CN110438124A 申请公布日 2019-11-12
分类号 C12N15/11(2006.01)I; C12Q1/70(2006.01)I; C12Q1/6858(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 杨芳梅; 卢德景; 徐红梅 申请(专利权)人 合肥欧创基因生物科技有限公司
代理机构 杭州裕阳联合专利代理有限公司 代理人 合肥欧创基因生物科技有限公司
地址 230000 安徽省合肥市蜀山区高新区创新大道106号明珠产业园3#5层D区
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种高通量检测探针及其熔解曲线检测方法及其应用,本发明的探针在扩增阶段形成类似发卡结构的分子信标探针,该探针利用多个G碱基对探针的荧光进行淬灭,在后续的熔解程序段,该探针与靶核酸发生熔解,根据探针的5’尾巴序列的碱基组成或在扩增子下游区域的延伸长度调节Tm值,探针可使用多色荧光基团标记,利用多通道从而达到更高通量的检测目的,单个通道至少检测8个靶核酸;检测探针在第一轮扩增时,其靶序列特异性结合序列Ⅰ与靶核酸特异结合,此时靶序列特异性结合序列Ⅱ被酶切,形成第二轮延伸的引物,通过两次特异性结合,增强了检测特异性,形成更窄的熔解峰,提高了通道利用效率,也同时提高了检测灵敏度。