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一种连续切向流干细胞分离纯化方法

基本信息

申请号	CN202011165699.9	申请日	-
公开（公告）号	CN112342192A	公开（公告）日	2021-02-09
申请公布号	CN112342192A	申请公布日	2021-02-09
分类号	C12N5/0775(2010.01)I;	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	曹毓琳;滕睿頔;王颖	申请（专利权）人	唐颐控股（深圳）有限公司
代理机构	北京卓爱普专利代理事务所（特殊普通合伙）	代理人	王玉松;宋丹丹
地址	100010北京市西城区西什库大街31号院23号楼
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种连续切向流干细胞分离纯化方法，该方法主要包括以下步骤：S1：将间充质干细胞放入反应器中，加入微载体和无血清完全培养基培养7天，用生理盐水清洗，再加入胰酶消化30min，回填无血清完全培养基终止消化，制得预处理液；S2：将预处理液放置于料液瓶内，将所述料液瓶连入TFF系统，在所述TFF系统的出液口管路末端连接透过液收集瓶，回流液管路连接到料液瓶，当透过液收集瓶收集一定体积的废液时，向料液瓶中加入等量洗液，洗液加入完毕，清空透过液收集瓶，待料液瓶中料液剩余预计体积时，停止系统运行，即得间充质干细胞；本发明提供的连续切向流干细胞分离纯化方法得到的细胞回收率在80％以上，细胞活率可达到85％以上。