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一种分子标签的制备方法

基本信息

申请号	CN201610496676.3	申请日	-
公开（公告）号	CN106119356B	公开（公告）日	2019-09-24
申请公布号	CN106119356B	申请公布日	2019-09-24
分类号	C12Q1/6806	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	王海龙;胡妮;徐健;唐元华	申请（专利权）人	首度生物科技（苏州）有限公司
代理机构	苏州市中南伟业知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	冯瑞
地址	215123 江苏省苏州市工业园区星湖街218号生物纳米园A3 118
法律状态	-

摘要

本发明涉及一种分子标签的制备方法，包括以下步骤：在DNA分子模板的5′接头端引入barcode序列；用DNA聚合酶延伸3′接头端，与barcode序列互补，得到补齐序列；向补齐序列中加入DNA聚合酶，在补齐序列的3′接头端引入胸腺嘧啶，得到改造的接头；将待测DNA破碎成DNA短片段，用DNA连接酶连接DNA短片段与改造的接头，得到DNA连接产物；聚合酶链式反应扩增DNA连接产物，得到扩增产物；对扩增产物进行测序，然后比对到人类参考基因组，在多个DNA模板副本中选取碱基错误率最低的DNA序列，即为分子标签。该分子标签技术通过改变barcode长度，去除固定序列，减少测序中数据的浪费，提高了反应速率，能有效区分DNA扩增过程中的错误和真实的DNA变异。