一种转基因猪筛选标记基因敲除的方法

基本信息

申请号 CN201410157596.6 申请日 -
公开(公告)号 CN103993027B 公开(公告)日 2017-09-26
申请公布号 CN103993027B 申请公布日 2017-09-26
分类号 C12N15/63(2006.01)I;C12N15/873(2010.01)I;C12N5/073(2010.01)I;A01K67/027(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李宁;孙照霖;康倩倩;李秋燕;赵蕊 申请(专利权)人 北京济福霖生物技术有限公司
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人 中国农业大学;北京济福霖生物技术有限公司
地址 100193 北京市海淀区圆明园西路2号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于基因工程领域,本发明提供了一种转基因猪筛选标记基因敲除的方法,具体为:1)构建自我剪切元件TmOCN;2)构建带有自我剪切元件的打靶载体;3)筛选阳性克隆细胞;4)体细胞克隆获得F0代标记基因去除的阳性猪。其中剪切元件TmOCN中:TmO代表精简的小鼠早期胚胎发育转录因子OCT4的特异启动子;C代表Cre重组酶基因;N代表转基因动物常用的neo筛选标记基因。所述自我剪切元件TmOCN在SCNT过程中的猪早期胚胎发育阶段特异启动Cre酶进行自我剪切,达到在F0代自动敲除标记基因的目的。