稳定表达生物素连接酶BirA的细胞株制备方法及其应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

稳定表达生物素连接酶BirA的细胞株制备方法及其应用

基本信息

申请号	CN202110288528.3	申请日	-
公开（公告）号	CN113061589A	公开（公告）日	2021-07-02
申请公布号	CN113061589A	申请公布日	2021-07-02
分类号	C12N9/00（2006.01）I;C12N15/85（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12P21/00（2006.01）I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	韩照中;潘红芽	申请（专利权）人	领诺（上海）医药科技有限公司
代理机构	-	代理人	-
地址	201203上海市浦东新区蔡伦路781号607室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种稳定表达生物素连接酶Bir A的细胞株制备方法及其在重组蛋白体内定点生物素化中的应用。本发明提供了该细胞株的构建方法及其应用实例：将Bir A基因插入真核表达载体；转染宿主细胞得到稳定表达BirA的细胞系；构建带Avi‑蛋白纯化联合标签的重组蛋白表达载体；转染BirA细胞系用于生产体内定点生物素化蛋白。本发明的独特之处在于实现了BirA基因在真核哺乳动物细胞内表达和重组蛋白体内定点生物素化；选用HEK 293F为宿主细胞，便于在生产重组蛋白的同时进行细胞内的定点生物素化，提高了后续进行生物学功能检测的效率；提供了应用HEK 293F‑Bir A细胞株生产体内生物素化重组蛋白检测、鉴定的基本方法和技术途径。