一种维持细胞表型的肝干细胞体外高活性三维扩增方法

基本信息

申请号 CN201611266833.8 申请日 -
公开(公告)号 CN106754659B 公开(公告)日 2017-05-31
申请公布号 CN106754659B 申请公布日 2017-05-31
分类号 C12N5/074(2010.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 向红先 申请(专利权)人 绍兴橡树企业管理咨询合伙企业(有限合伙)
代理机构 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 浙江领蔚生物技术有限公司;绍兴橡树企业管理咨询合伙企业(有限合伙)
地址 浙江省绍兴市越城区人民东路1423号2号楼101室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种维持细胞表型的肝干细胞体外高活性三维扩增方法,其包括如下步骤:(1)准备培养基,培养基成分为:1L DMEM/F12、15‑20mg/L成纤维细胞生长因子胰岛素10‑15mg/L、0.1‑0.2mg/L谷氨酸、0.5‑0.8mg/L尼克酰胺、0.1‑0.2mg/L亚硒酸、0.05‑0.1mg/Lβ‑巯基乙醇、0.1‑0.6mg/Lα肌动蛋白、0.2‑0.3mg/L醋酸钠、0.001‑0.003mg/L丙酮酸钠和占总培养基重量2‑3%的胎牛血清;(2)将灭菌后的多孔凝胶浸没于培养基中,将肝干细胞接种至多孔凝胶中,然后进行培养。本发明能获得表型稳定、活性高的干细胞,可以保持良好的干细胞特性。